細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境，使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō)，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)不可少的過(guò)程，是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)，通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞，又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖等。

體外培養(yǎng)高度依賴(lài)培養(yǎng)體系與培養(yǎng)環(huán)境，本期內(nèi)容為大家解析，常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)體系中的培養(yǎng)環(huán)境的關(guān)鍵要素。

01

細(xì)胞培養(yǎng)塑料耗材

隨著相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，不同種類(lèi)的的塑料逐漸用于細(xì)胞培養(yǎng)和基于細(xì)胞的檢測(cè)。

大多數(shù)脊椎動(dòng)物細(xì)胞均具有貼壁依賴(lài)的特質(zhì)，因此需要對(duì)培養(yǎng)器皿表面進(jìn)行特殊處理，以便細(xì)胞附著和生長(zhǎng)。

常用的細(xì)胞培養(yǎng)器皿有以下幾類(lèi)：

培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)瓶大小為12.5 cm^2到300 cm^2 不等，有直頸、彎頸兩種。

彎頸培養(yǎng)瓶的的使用更為普遍：操作更簡(jiǎn)便，實(shí)驗(yàn)者更容易接觸到整個(gè)生長(zhǎng)表面；操作更安全，防止培養(yǎng)基接觸到蓋子，并允許從培養(yǎng)瓶中倒出培養(yǎng)基且減少滴落。

培養(yǎng)皿

一次性的專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于支持培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖的淺容器。尺寸選擇也很多，可清除地在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。配有蓋子，提供連續(xù)的氣體交換與環(huán)境保護(hù)。

孔板

細(xì)胞培養(yǎng)板的孔數(shù)從4個(gè)到384個(gè)不等，可一次用于多種培養(yǎng)。

滾瓶

滾瓶更適合疫苗工業(yè)規(guī)模的生產(chǎn)、單克隆抗體和生物治療等應(yīng)用。與培養(yǎng)瓶相比，滾瓶具有更大的生長(zhǎng)表面

腔式載玻片

腔式載玻片包含一個(gè)可拆卸的培養(yǎng)基腔室，實(shí)驗(yàn)人員可以在單獨(dú)的顯微鏡載玻片上對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行接種、培養(yǎng)等操作。

02

pH值

大多數(shù)正常的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系都能在pH值為7.4的環(huán)境中生長(zhǎng)良好，而且不同細(xì)胞 株間差異也并不大。

后來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，有些轉(zhuǎn)化細(xì)胞系在略微偏酸性的環(huán)境（pH 7.0-7.4）中也能較好生長(zhǎng)；而有些成纖維細(xì)胞系則更適合在略微偏堿性的環(huán)境（pH7.4-7.7）中生長(zhǎng)；而某些昆蟲(chóng)細(xì)胞系在pH值為6.2的環(huán)境中生長(zhǎng)情況更佳。

03

二氧化碳

細(xì)胞培養(yǎng)基中的一些成分，可以控制培養(yǎng)體系中的pH值，提供緩沖作用。一般情況下，該緩沖作用通過(guò)添加有機(jī)緩沖液（HEPES）或者碳酸氫鹽緩沖液實(shí)現(xiàn)。

溶解態(tài)二氧化碳與碳酸氫根間的平衡，決定了培養(yǎng)基的pH值，因此，培養(yǎng)環(huán)境中空氣中二氧化碳的含量變化，也會(huì)改變培養(yǎng)基的pH值。為此，使用含碳酸氫鹽緩沖液的培養(yǎng)基時(shí)，需配合使用外源性二氧化碳。

04

溫度

某種細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)所需適宜溫度，主要取決于該供體物種的體溫，以及解剖部位體溫（同一物種不同組織培養(yǎng)溫度可能不同）。通常情況下，高溫對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響大于低溫。總的來(lái)說(shuō)，溫度控制建議在以下范圍：

1、大多數(shù)人類(lèi)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系在36°C——37°C下具有比較好的生長(zhǎng)狀態(tài)。

2、昆蟲(chóng)細(xì)胞在27°C下培養(yǎng)狀態(tài)較好；它們?cè)诟哂诨虻陀谠摐囟?，生長(zhǎng)較慢。當(dāng)培養(yǎng)溫度高于30°C時(shí)，會(huì)降低昆蟲(chóng)細(xì)胞的存活率。

3、禽類(lèi)細(xì)胞系則需要38.5°C可實(shí)現(xiàn)更好的生長(zhǎng)。

4、源自冷血?jiǎng)游?，比如兩棲?lèi)生物，冷水生活的魚(yú)類(lèi)的細(xì)胞系，適宜生長(zhǎng)的溫度則更寬，15°C至26°C范圍內(nèi)，均有比較好的生長(zhǎng)狀況。

?

好物推薦

體外細(xì)胞的高效培養(yǎng)，除了適宜的培養(yǎng)環(huán)境，優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)體系也至關(guān)重要。

選擇一款高質(zhì)量的血清產(chǎn)品，盡可能降低外源物質(zhì)的的干擾，為細(xì)胞提供充足的營(yíng)養(yǎng)。Ausbian品牌系列血清，精選內(nèi)毒素更低的批次，通過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè)，各類(lèi)微生物檢測(cè)結(jié)果均是未檢出，為細(xì)胞的體外培養(yǎng)保駕護(hù)航。